本站原创摘 要 :文章通过植物组织培养试验,研究了不同灭菌时间对培养基灭菌效果和葡萄试管苗繁殖的影响,试验结果表明:在额定的压力条件下,对培养基灭菌时间达到25分钟时其灭菌效果最理想,可完全灭菌,但是随着培养基灭菌时间的延长,对葡萄试管苗的生长发育将产生不利影响.
关 键 词 :葡萄试管苗,灭菌时间,培养基,灭菌效果
中图分类号:S663.1 文献标识码:A 文章编号:1674-0432(2010)-10-0041-1
0 前言
葡萄试管苗繁殖己成为一项成熟的技术应用于科学研究和实践当中.近年来,国内在葡萄离休繁殖技术方面开展了不少研究,并取得明显进展,刘培德等(1983)报道了葡萄茎尖培养,曹孜义等(1979)报道了葡萄试管苗快速繁殖技术,为葡萄快速繁殖提出了一套可行的离体繁殖方法.在葡萄试管苗的工厂化育苗过程中,对葡萄培养基进行高温高压灭菌是其关键步骤之一,本试验研究不同灭菌时间对培养基和葡萄试管苗繁殖的影响,以期为葡萄组织培养和规模化生产提供重要的理论依据和实践意义.
1.材料与方法
对葡萄培养基按灭菌时间的长短,设3个处理,分别为A:l5分钟,B:20分钟,C:25分钟.每处理20瓶(为150ml容量三角瓶),每瓶内装GS培养基50ml,在压力上升至0.14MP、温度达到124℃时完全排除冷空气,再加热至124℃,压力达到0.14MP时开始计时,达到各处理的灭菌时间后,逐渐排气减压,冷却后在培养架的光照条件下放置3-7天内调查污染情况,l周后在未污染的培养基上转接红宝石无核葡萄脱毒种苗,转接时每茎段留1个芽.每瓶内接5个茎段,接种后25天调查试管苗的增殖倍数.
2.结果与分析
由表1可以看出,A处理灭菌时间最短,为15分钟,污染率达100%,灭菌效果最差,B处理20分钟,污染率次之,为65%,C处理25分钟,污染率为0,灭菌效果最好.因此,在额定的压力条件下,灭菌时间达到25分钟,就可达到完全灭菌的效果.
注:表内的接种材料为红宝石无核
由表2可以看出,C处理茎段生根率,每茎段生根数,芽的增殖倍数分别为71.7%、3.2条、2.3倍,B处理的为88.6%、4.4条、3.0倍.其中C处理的茎段生根率,每茎段生根数,芽的增殖倍数各项指标比B处理低16.9%、2.2条、1.7倍.A处理由于培养基全部污染,未进行接种.可见,随着培养基灭菌时间的延长,对葡萄试管苗的生长发育将产生不利影响.
3.结论
试验结果表明,在额定的压力条件下,对培养基灭菌时间达到25分钟时其灭菌效果最理想,可达到完全灭菌的效果,但是随着培养基灭菌时间的延长,对葡萄试管苗的生长发育将产生不利影响.室内试管苗的扩繁,培养基的高压灭菌一定要充分,灭菌时间太短,达不到灭菌效果,而灭菌时间过长,将使培养基中的有些激素、维生素类等营养成份被破坏或分解,不利于试管苗的生长发育和繁殖倍数的提高.因此,在实际应用中,培养基的高压灭菌,应在额定压力条件下,灭菌时间以25分钟为宜,在达到灭菌效果(100%)以后,不能人为地延长时间,否则,不但影响葡萄试管苗的正常生长发育,还人为地加大了用电成本,不利于节本增效.