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国家级大学生创新创业训练计划项目

申报表

推荐学校临沂大学

项目名称转AhMT2a基因拟南芥重金属抗性分析

项目类型创新训练项目

所属一级学科名称生物学

所属二级学科名称生物化学与分子生物学

项目负责人赵斌陈孝利

申报日期2016年3月18日

二○一二年三月项目名称转AhMT2a基因拟南芥重金属抗性分析项目类型(√)创新项目()创业训练项目()创业实践项目项目实施时间起始时间:2016年3月完成时间:2016年4月申请人或申请团队姓名年级学校所在院系

/专业联系E-mail主持人赵斌2016临沂大学生命科学学院/生物科学15253987559846739740@.陈孝利2016临沂大学生命科学学院/生物科学156668363191073391960@.成员李静2016临沂大学生命科学学院/生物科学15165528625414757599@.王丽娟2016临沂大学生命科学学院/生物科学150928890521573242488@.刘茹2016临沂大学生命科学学院/生物科学1553985113879942522@.指导教师姓名全先庆研究方向植物逆境分子生物学年龄44行政职务/专业技术职务副院长/副教授主要成果1,近几年发表的论文


(1)CloningandcharacterizationofTsMT3,atype3metallothioneingenefromsaltcress(Thellungiellasalsuginea),DNASequence,2016.6,首位

(2)Afirstsetofpolymorphicmicrosatellitelocifromthemarbledrockfish,Sebastiscuarmoratus,BiochemicalGeics,2016.8,并列第一

(3)花生金属硫蛋白基因AhMT3a的克隆及其表达研究,生物技术通报,2016.3,首位

(4)沂州木瓜种仁油脂体外抗氧化能力研究,食品工业科技,2016.1,首位,近几年主持的课题

(1)花生金属硫蛋白基因家族的克隆及其功能分析,山东省自然科学基金,2007-2016年,主持人

(2)花生栽培种及野生种中抗病相关miRNA的鉴定和功能研究,国家自然科学基金,2016-2016年,第二主持人一,项目实施的目的,意义

重金属污染是一个全球性问题,严重影响农业生产和生态平衡,威胁着人类健康.研究植物的重金属耐受机制和重金属代谢相关基因,利用植物基因工程技术对重金属污染的土壤和水体进行植物修复是目前的研究热点之一.

重金属在土壤或水体底泥中可以不断积累,很难被清除,镉等许多有害重金属在土壤中具有较强的移动性,容易被植物吸收,并可以通过植物的富集作用进入食物链.目前还没有行之有效的清除环境重金属污染的方法.许多植物具有对某些重金属的超累积能力和耐受能力,许多实验表明金属硫蛋白(metallothionein,MT)在其中起着重要作用.MT是一类小分子量蛋白质,在植物中多以基因家族形式存在.研究表明:MT在重金属清除,累积和活性氧清除等方面具有重要作用.植物MT分为四类,每一类都含有多个成员.很多植物的MT基因在用某些重金属处理后表达量明显增加,许多MT基因的原核表达,酵母功能互补实验以及植物转化实验显示MT基因的表达能够提高转化子对某些重金属的抗性和累积量.金属对MT基因表达的影响多表现出物种,组织,发育阶段特异性,也与MT的类型和金属种类有关,其分子机理尚不清楚,关于植物MT与金属关系的实验证据也还不多.弄清MT与重金属作用的分子机理具有重要的理论意义和深远的现实意义.此前,我们克隆到花生的7个金属硫蛋白基因,并对其中1个type2MT基因进行了研究,研究了该基因的表达特性,构建了原核表达载体进行了原核表达,构建了植物表达载体并利用农杆菌浸染法将该基因转化到拟南芥中,筛选到T3代株系,本项目拟对转化AhMT2a基因的拟南芥的重金属抗性进行分析.二,项目研究内容和拟解决的关键问题

1,研究内容

(1)研究转AhMT2a基因拟南芥对Cd2+,Cu2+,Pb2+等的耐受情况,

(2)研究转AhMT2a基因拟南芥在Cd2+,Cu2+,Pb2+等条件下重金属离子的积累情况,

(3)研究转AhMT2a基因拟南芥在Cd2+,Cu2+,Pb2+等条件下生理指标变化情况.

2,拟解决的关键问题

(1)转AhMT2a基因拟南芥Cd2+,Cu2+,Pb2+等含量的测定,

(2)转AhMT2a基因拟南芥生理指标的测定.

三、项目研究与实施的基础条件

指导教师长期从事花生分子生物学研究,积累了丰富的实践经验,并已取得了显着成绩:

1,构建了花生种子cDNA文库,克隆到3类共7个MT基因,

2,初步分析了花生MT基因AhMT2a的功能,

3,获得了转化AhMT2a基因的拟南芥T3代种子.

四、项目实施方案

1,研究方法

2,项目的计划进度及阶段目标

五,学校可以提供的条件临沂大学生物实验教学中心为省级实验教学示范中心有各类实验室70多,面积13000多平方米,仪器设备总值3000多万元,有荧光定量PCR仪,电子扫描显微镜,双向电泳仪,膜片钳系统等仪器设备分子生物学实验室主要仪器设备有:PCR仪,电泳及转印系统,凝胶成像分析系统,高速冷冻离心机,超低温冰箱,冰箱,颗粒制冰机,超纯水,通风橱,恒温培养箱,移液器,电融合仪,二氧化碳培养箱,电穿孔仪等,建有专门的电泳室和实验准备室.临沂大学资源与环境分析化学实验室为省级重点实验室,是本项目完成的重要平台.六,预期成果

1,了解AhMT2a基因在重金属耐受中可能发挥的作用.

2,在国内核心期刊发表论文1篇以上.七,经费预算经费来源预算经费支出预算科目预算数(万元)科目预算数(万元)来源预算合计1.5支出预算合计1.5单位自筹0.5材料费0.3其它来源1测试化验加工费0.差旅费0.1出版/文献/信息传播/知识产权事务费0.3专家咨询费0.1八,导师推荐意见

本项目有较为扎实的前期工作基础,有设施完备的研究平台,与本项目研究有关的师资力量较为雄厚,现主持国家自然科学基金,山东省博士基金,山东省自然科学基金等项目多项,主持,参与该项目的同学均有较高的学习热情,善于思考,多有在分子生物学实验室,细胞生物学实验室帮助老师进行实验准备的基础,分析问题,解决问题的能力较强,两位同学较早参与了教师的课题研究.相信在指导教师的指导下,同学们能顺利完成该项目研究.

本人郑重推荐该项目申报国家级大学生创新创业训练计划.

签名:

年月日九,院系推荐意见

院系负责人签名:学院盖章

年月日十,学校推荐意见:

学校负责人签名:学校盖章

年月日十一,省教育厅评审意见:

单位盖章

年月日注:表格栏高不够可增加.

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